История
История
Аппликатор автоматический АПА 2 создан для автоматизации нанесения проб жидких смесей в форме линий или точек на адсорбирующую поверхность пластин, используемых для тонкослойной хроматографии. Емкости для образцов, используемые с аппликатором — виалы объемом 2 мл, снабженные закручивающейся крышкой, в качестве уплотнителя применяется силиконовая прокладка. Образец напыляется на пластину с использованием давления воздуха. Подготовка проб посредством создания узких полосок вещества позволяет достичь максимально высокого показателя разрешения в тонкослойной хроматографии.
Тонкослойная хроматография (ТСХ) — метод, применяемый для выделения нелетучих смесей. Для его использования требуется пластина, покрытая тонким слоем адсорбента (алюминия, целлюлозы, силикогеля). Неподвижная фаза располагается на пластине в виде твердого напыления тонким слоем, подвижную фазу размещают на ней же поверх адсорбента при помощи аппликаторов. ТСХ — один из самых оперативных, дешевых и легко применимых методов хроматографии.
Тонкослойная хроматография применяется для измерений содержания компонентов в лекарственных препаратах и для разделения фармацевтических составов, для изучения состава биологических жидкостей, для идентификации натуральных продуктов (эфирных масел, гликозидов, разновидностей воска, алкалоидов).
Все пластинчатые аппликаторы для ТСХ удобны в применении и способны обеспечить быстрое, точное и легко воспроизводимое нанесение пятен. Преимущество автоматических аппликаторов состоит в том, что они исключают ошибки, связанные с человеческим фактором. В каждый шприц нужно вводить небольшое количество пробы за один раз. С помощью ручной пипетки сложно контролировать поток раствора и гарантировать нанесение образцов очень тонким слоем, что необходимо для использования метода тонкослойной хроматографии. Полностью автоматизированный аппликатор позволяет контролировать процесс нанесения проб при помощи компьютера или встроенной системы цифрового управления, что повышает точность нанесения проб и обеспечивает хорошую воспроизводимость результатов.
Аппликатор механический необходим для точечного нанесения проб и растворов изучаемых смесей на пластины. Позволяет осуществлять тонкую дозировку стандартных растворов и других проб. Аппликатор требует использовать в качестве дополнительного оборудования нагревательное устройство и микро-шприц.
Тонкослойная хроматография (ТСХ)— один из наиболее эффективных и доступных методов, применяемых для тестирования препаратов (седативных лекарств, местных анестетиков, транквилизаторов, обезболивающих средств и т.д.). Она применяется в биохимических исследованиях (выделение биохимических метаболитов из плазмы крови, сыворотки и прочих биологических жидкостей. На пищевом производстве метод применим для разделения и идентификации пищевых добавок: подсластителей, консервантов. В лабораториях косметических производственных компаний при помощи ТСХ изучают степень завершенности химических реакций.
Ручное нанесение образцов требует высокой квалификации и сноровки. Механический аппликатор упрощает задачу, работая в полуавтоматическом режиме. Он применим в ситуациях, когда допустима небольшая погрешность в измерениях, поскольку аппарат снизить погрешность в нанесении проб, но не исключает ее полностью. Аппликатор механический позволяет правильно расположить на пластине стартовые пятна и минимизировать их размер.
Визуализатор (денситометр) с программой Sorbfil TLC View применяется для создания снимков хроматографов, используемых для анализа компонентов, видимых при дневном освещении или при люминисценции, возникающей при УФ-облучении с длиной волн 245 и 365 нм. Аппарат на основе изображений хроматограмм дает возможность осуществить два типа расчетов: процентный состав и концентрацию компонентов в образце. Закрытая камера прибора позволяет проводить анализ результатов с использованием ультрафиолетового облучения в обычной комнате (темное помещение не требуется).
В тонкослойной хроматографии (ТСХ) визуализация данных является важной операцией, которая в значительной степени определяет качество получаемых результатов. Задача исследователя на этой стадии — визуализация пятен разделенных веществ на неподвижной фазе адсорбента пластины. Аппарат прост в применении, не требует долгого обучения в работе с ним, существенно ускоряет процесс обработки данных.
Визуализатор этой модели позволяет не изменять методики ТСХ, встроенное программное обеспечение рассчитывает данные на основе видеоизображения пластины и строит аналоговую кривую (хроматограмму) на основании отклонения яркости пятен пробы от яркости фона адсорбента, нанесенного тонким слоем на пластину. Пики и площадь кривых дают возможность приложению осуществить количественный расчет на основе полученной хроматограммы. За основу расчета берется принцип пропорциональности количества компонента в пятне его размерам и яркости. В качестве дополнительного оборудования требуется ноутбук или компьютер, которые в комплект не входят. А также полезным будет применение механических или автоматических аппликаторов для более тонкого и точного нанесения проб на пластины.
Денситометр с осветительной камерой, оснащенный программой Sorbfil TLC View, нужен для анализа данных, получаемых при разделении веществ методами тонкослойной хроматографии (ТСХ). Он адаптирован для общепринятых методик, их пересмотр не является необходимым. Аппарат способен рассчитать хроматограмму, визуализируемую в видимом спектре дневного освещения или при ультрафиолетовом облучении с длиной волн 365 и 254 нм. На базе снимков, полученных при помощи хроматографа, проводится расчет двух характеристик: концентрации и процентного содержания компонентов.
Изображение отправляется на ноутбук или компьютер, где эксперт может обработать данные в специализированном приложении. Такая организация процесса существенно ускоряет исследовательский процесс, снижая уровень погрешности и улучшая возможность воспроизведения эксперимента.
Визуализация данных — важная стадия анализа с применением метода ТСХ. Метод основан на принципе нанесения проб (подвижная фаза) на пластины (неподвижная фаза), покрытые тонким слоем адсорбента.
Денситометр имеет простую конструкцию, работа с ним не требует долгого обучения оператора. Погрешность измерения составляет от 3 до 10%. Применение устройства для визуализации данных позволяет проводить количественные, а не только качественные, исследования, что расширяет возможности лаборатории.
Преимуществами модели является высокая скорость проведения расчетов, дешевизна расходных материалов. Устройство позволяет сохранять хроматограммы в электронном виде, что дает возможность возвращаться к анализу спустя некоторое время, позволяет делиться ими с другими экспертами посредством электронной почты или распечаток. По сравнению с механическими денситометрами, которые распространены в лабораториях с 1970-х годов, видео-денситометр позволяет сократить время на обработку данных в 10 раз (с 30 минут на механическом до 2-3 минут на видео-денситометре). Для осуществления задачи в камере прибора обеспечивается максимально равномерное освещение.
Денситометр с планшетным сканером, оснащенный специализированным программным обеспечением, используется для вычисления и анализа данных тонкослойной хроматографии (ТСХ). Применяется для разделения и изучения веществ в видимом спектре. Аппарат дает возможность провести два типа вычислений: процентное содержание и концентрация компонента в образце. Процедура анализа подразумевает размещение пластины на стекле сканера, снимок отправляется на ноутбук или компьютер, где сохраняется и проходит обработку в специализированном приложении. Программа снижает трудозатраты на проведение вычислений, уменьшает погрешность измерения, оснащена функцией создания библиотеки данных для последующего сравнения измерений. Она представляет результаты в виде таблиц и графиков с текстовыми пояснениями, их можно сохранить на компьютер, отправить по почте или распечатать на принтере.
Наличие устройства в лаборатории расширяет функции денситометра, повышая воспроизводимость результатов до 98% при условии тонкого и аккуратного нанесения слоя пробы. Минимизировать погрешность можно при помощи аппликаторов для нанесения проб (механического и автоматического типа).
Можно выполнять воспроизводимое градиентное элюирование на пластинах с силикагелем.
Нагревательное устройство УСП-2 разработано для нагрева пластин с нанесенными на них пробами; контролируемый подогрев используется на разных этапах измерения при разделении веществ методами тонкослойной хроматографии. Прогрев неподвижной фазы (пластины) до нужной температуры позволяет обеспечить минимально возможный размер пятен, что важно для некоторых типа измерений (например, при исследовании на мико-токсины). Минимальная площадь пятен улучшает четкость выделения веществ и качество результатов. Функция подогрева пластин после помещения на них образцов и реагентов ускоряет сушку или проявление пятен для последующей визуализации при помощи денситометра.
Модель оснащена микропроцессорным контроллером, позволяющим задавать параметры сушки и управлять процессом. При отсутствии аппликаторов для нанесения проб (механических или автоматических) можно воспользоваться линейкой съемного типа с расположенными на ней пазами, они находятся в 10 мм друг от друга.
Тонкослойная хроматография считается одним из самых надежных методов разделения веществ по типу адсорбции и анализа их концентрации в смеси. Наносимый на пластину раствор пробы визуализируется при помощи денситометра, изображение хроматограмм передается на компьютер для автоматизированного анализа. Однако метод имеет свои недостатки: так как он работает, как открытая система, некоторые факторы могут повлиять на конечный результат хроматографии (например, влажность, температура окружающей среды). Использование нагревательного устройства позволяет проконтролировать часть этих параметров, что повышает качество анализа.
Облучатель хроматографический УФС 254/365 нужен для отображения данных хроматографического анализа, когда в смеси присутствуют образцы органических соединений. Они не визуализируются при дневном свете, их приходится изучать в невидимой части спектра (в ультрафиолетовом свете).
В тонкослойной хроматографии ультрафиолетовое облучение необходимо для обнаружения органических соединений на пластине, поскольку многие органические компоненты поглощают УФ-лучи. Визуально при изучении пластины при видимом спектре света органические соединения чаще всего кажутся бесцветными на фоне пластинки для ТСХ, что означает, что химики-исследователи не могут увидеть, где находятся пятна соединений, невозможно без применения УФ-облучения определить площадь и построить хроматографические пики на изображении. Визуализация органических компонентов после элюирования является временной, УФ-лучи преобразовывают невидимые пятна во что-то видимое.
При хроматографическом анализе смесей компоненты, флюоресцирующие при длине волны 365 нм, отображаются, как цветовые пятна на затемненном фоне, а ингредиенты смеси, поглощающие УФ-свет на длине волны 254 нм, проступают в виде темных пятен на пластине ТСХ, на которой нанесен УФ-индикатор. Таким образом, когда пластина подвергается воздействию ультрафиолетового излучения, органические соединения поглощают УФ-лучи и становятся флуорисцентными, образуя на адсорбирующей поверхности пластины видимое пятно. В результате различные компоненты можно идентифицировать и количественно оценить.
Хроматографические облучатели, работающие в ультрафиолетовом спектре, позволяют использовать тонкослойную хроматографию для быстрого и простого определения чистоты образца или для контроля химического процесса. Кроме того, использование УФ-излучения относится к неразрушающим методам визуализации, соединения после завершения анализа остаются в неизменном виде. Альтернативой может стать химическое окрашивание, которое относится к деструктивным методам, соединения после его использования превращаются в новые вещества, вступая в реакцию с красителями.
Использование аппарата для равномерного нанесения на пластины проявляющей жидкости необходимо, если стоит задача проведения точных количественных измерений и вычислений при построении хроматограмм. Устройство позволяет анализировать количественный состав смеси посредством равномерного погружения пластин с пробами в жидкость для проявления пятен. Такой способ повышает качество визуализации пятен и равномерно окрашивает фон адсорбента, покрывающего поверхность пластинки, если сравнивать его с использованием опрыскивателя.
Тонкослойная хроматография считается одним из самых простых, точных и бюджетных методов разделения веществ и изучения их концентраций в смеси. Человеческий фактор может искажать результаты и повышать погрешность измерений.
На качество визуализации пятен влияет множество факторов: используемая система растворителей, количество материала для образцов, тип адсорбента и температура, при которой проводится измерение. Качество обработки пластин растворами и проявляющими жидкостями зависит от действий оператора. Проявляющее устройство снижает риски воздействия человеческого фактора на точность анализа.
Для повышения качества визуализации хроматограмм при помощи денситометра желательно автоматизировать проявление пятен. Это упрощает работу оператора, ускоряет процесс исследования и повышает качество измерения.
С помощью личного кабинета Вы сможете:
Сравнение
