Набор для определения апоптоза Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit A213 содержит:

Все компоненты этого набора хранятся при температуре 2-8 °C до 12 месяцев. Окрашивающий раствор Annexin V-PE и 7-AAD следует хранить в темноте и не замораживать.

Товар временно недоступен. Аналоги по запросу ниже.

Антитела к рецептору IL-2 альфа (CD25), конъюгированные с PE, мышиные моноклональные (клон BC96):

• для проточной цитометрии;
• клон — BC96;
• изотип — IgG1;
• флуорохром — R-фикоэритрин (PE);
• виды — человек, шимпанзе, бабуин, яванский макак, макак-резус;
• состав буфера — 0,87% хлорид натрия, 0,14% дигидрофосфат натрия, 0,1% желатин, 0,09% азид натрия.

Товар временно недоступен. Аналоги по запросу ниже.

Антитела к CD69 человека, конъюгированные с PE, мышиные моноклональные (клон FN50):

• для проточной цитометрии (20 мкл антител на 100 мкл крови);
• клон — FN50;
• изотип — IgG1;
• флуорохром — R-фикоэритрин (PE);
• иммуноген — anti-µ-stimulated Human B lymphocyte;
• состав буфера — PBS, 0,2% BSA, 0,1% азид натрия.

Технология Firefly основана на использовании технологии кодирующих микрочастиц , что обеспечивает возможность мультиплексирования при анализе микро-РНК на стандартном проточном цитофлуориметре. Данный подход позволяет детектировать до 68 мишеней в одной лунке.

Дополнительная нформация:

• Онкология;
• Исследования стволовых клеток;
• Сердечно-сосудистые заболевания;
• Иммунология.

Преимущества метода:

• Простота: не требует мучительного выделения РНК из образцов;
• Быстрый: подготовка к анализу всего за 1 час;
• Высокая чувствительность сопоставимая с ПЦР-анализом;
• Открытость наборов: наборы Firefly можно использовать на любых проточных цитофлуориметрах с каналами детекции по Cy-3, Cy-5 и PE;
• Мультиплексность: детекция до 68 аналитов в 1 лунке;
• Высокая точность: каждая микроРНК детектируется несколькими типами частиц, что обеспечивает перекрытие данных по нескольким частицам.

Частицы Firefly выполнены из биоинертного гидрофобного пластичного материала и имеют размер 220 x 40 x 40 мкм. Такая форма и размер позволяет частицам беспроблемно проходить через проточные ячейки любых проточных цитофлуориметров. Материал частиц легко разрушается гидроксидом натрия, что позволяет без особых усилий при необходимости промыть ячейку.

Каждая частица содержит три различных функциональных области, каждая из которых отделена инертными спейсерами. В центральной области частицы содержаться РНК-зонды, комплиментарные к целевой микро-РНК. Два концевых участка исполняют кодирующую функцию.

Проточный цитофлуориметр детектирует каждую частицу как серию трёх сигналов.

При прохождении частицы через проточную ячейку проточного цитоофлуориметра, прибор детектирует серию из 3х сигналов от каждой частицы и определяет интенсивность сигнала.

Декодирование типа частицы и уровня сигнала осуществляется специализированным ПО.

Программное обеспечение Firefly Analysis Workbench использует полученные данные для декодировния типа частицы и определения уровня микро РНК в пробе.

Интенсивность флуоресценции фикоэритрина (PE)-Cy5 из центрального участка определяет содержание той или иной микро РНК.

Проточный цитофлуориметр детектирует уровень сигнала центрального участка частицы. Интенсивность сигнала прямо пропорциональна уровню мкроРНК в образце.

Технология Firefly позволяет определять содержание до 68 микроРНК в одной лунке. Смесь частиц Firefly, каждая из которых кодирует отдельный тип микроРНК, позволяет получить информацию о содержании до 68 типов микроРНК в каждой лунке 96-луночного планшета с 20-кратной репликацией.

Концевые участки для идентификации типов частиц: два участка содержат флуоресцентный краситель Cy®3 с различной интенсивностью флуоресценции; каждая из частиц, содержащая уникальный комплементарный к микро-РНК участок, имеет разную интенсивность флуоресценции. Центральный (аналитный) участок: содержит зонды к специфичной целевой микро-РНК; захваченная целевая РНК красится флуоресцентными красителями PE-Cy5; интенсивность свечения этого региона пропорционально концентрации микро-РНК в лунке.

Технология Firefly основана на использовании технологии кодирующих микрочастиц , что обеспечивает возможность мультиплексирования при анализе микро-РНК на стандартном проточном цитофлуориметре. Данный подход позволяет детектировать до 68 мишеней в одной лунке.

Дополнительная нформация:

• Онкология;
• Исследования стволовых клеток;
• Сердечно-сосудистые заболевания;
• Иммунология.

Преимущества метода:

• Простота: не требует мучительного выделения РНК из образцов;
• Быстрый: подготовка к анализу всего за 1 час;
• Высокая чувствительность сопоставимая с ПЦР-анализом;
• Открытость наборов: наборы Firefly можно использовать на любых проточных цитофлуориметрах с каналами детекции по Cy-3, Cy-5 и PE;
• Мультиплексность: детекция до 68 аналитов в 1 лунке;
• Высокая точность: каждая микроРНК детектируется несколькими типами частиц, что обеспечивает перекрытие данных по нескольким частицам.

Частицы Firefly выполнены из биоинертного гидрофобного пластичного материала и имеют размер 220 x 40 x 40 мкм. Такая форма и размер позволяет частицам беспроблемно проходить через проточные ячейки любых проточных цитофлуориметров. Материал частиц легко разрушается гидроксидом натрия, что позволяет без особых усилий при необходимости промыть ячейку.

Каждая частица содержит три различных функциональных области, каждая из которых отделена инертными спейсерами. В центральной области частицы содержаться РНК-зонды, комплиментарные к целевой микро-РНК. Два концевых участка исполняют кодирующую функцию.

Проточный цитофлуориметр детектирует каждую частицу как серию трёх сигналов.

При прохождении частицы через проточную ячейку проточного цитоофлуориметра, прибор детектирует серию из 3х сигналов от каждой частицы и определяет интенсивность сигнала.

Декодирование типа частицы и уровня сигнала осуществляется специализированным ПО.

Программное обеспечение Firefly Analysis Workbench использует полученные данные для декодировния типа частицы и определения уровня микро РНК в пробе.

Интенсивность флуоресценции фикоэритрина (PE)-Cy5 из центрального участка определяет содержание той или иной микро РНК.

Проточный цитофлуориметр детектирует уровень сигнала центрального участка частицы. Интенсивность сигнала прямо пропорциональна уровню мкроРНК в образце.

Технология Firefly позволяет определять содержание до 68 микроРНК в одной лунке. Смесь частиц Firefly, каждая из которых кодирует отдельный тип микроРНК, позволяет получить информацию о содержании до 68 типов микроРНК в каждой лунке 96-луночного планшета с 20-кратной репликацией.

Концевые участки для идентификации типов частиц: два участка содержат флуоресцентный краситель Cy®3 с различной интенсивностью флуоресценции; каждая из частиц, содержащая уникальный комплементарный к микро-РНК участок, имеет разную интенсивность флуоресценции. Центральный (аналитный) участок: содержит зонды к специфичной целевой микро-РНК; захваченная целевая РНК красится флуоресцентными красителями PE-Cy5; интенсивность свечения этого региона пропорционально концентрации микро-РНК в лунке.

Технология Firefly основана на использовании технологии кодирующих микрочастиц , что обеспечивает возможность мультиплексирования при анализе микро-РНК на стандартном проточном цитофлуориметре. Данный подход позволяет детектировать до 68 мишеней в одной лунке.

Дополнительная нформация:

• Онкология;
• Исследования стволовых клеток;
• Сердечно-сосудистые заболевания;
• Иммунология.

Преимущества метода:

• Простота: не требует мучительного выделения РНК из образцов;
• Быстрый: подготовка к анализу всего за 1 час;
• Высокая чувствительность сопоставимая с ПЦР-анализом;
• Открытость наборов: наборы Firefly можно использовать на любых проточных цитофлуориметрах с каналами детекции по Cy-3, Cy-5 и PE;
• Мультиплексность: детекция до 68 аналитов в 1 лунке;
• Высокая точность: каждая микроРНК детектируется несколькими типами частиц, что обеспечивает перекрытие данных по нескольким частицам.

Частицы Firefly выполнены из биоинертного гидрофобного пластичного материала и имеют размер 220 x 40 x 40 мкм. Такая форма и размер позволяет частицам беспроблемно проходить через проточные ячейки любых проточных цитофлуориметров. Материал частиц легко разрушается гидроксидом натрия, что позволяет без особых усилий при необходимости промыть ячейку.

Каждая частица содержит три различных функциональных области, каждая из которых отделена инертными спейсерами. В центральной области частицы содержаться РНК-зонды, комплиментарные к целевой микро-РНК. Два концевых участка исполняют кодирующую функцию.

Проточный цитофлуориметр детектирует каждую частицу как серию трёх сигналов.

При прохождении частицы через проточную ячейку проточного цитоофлуориметра, прибор детектирует серию из 3х сигналов от каждой частицы и определяет интенсивность сигнала.

Декодирование типа частицы и уровня сигнала осуществляется специализированным ПО.

Программное обеспечение Firefly Analysis Workbench использует полученные данные для декодировния типа частицы и определения уровня микро РНК в пробе.

Интенсивность флуоресценции фикоэритрина (PE)-Cy5 из центрального участка определяет содержание той или иной микро РНК.

Проточный цитофлуориметр детектирует уровень сигнала центрального участка частицы. Интенсивность сигнала прямо пропорциональна уровню мкроРНК в образце.

Технология Firefly позволяет определять содержание до 68 микроРНК в одной лунке. Смесь частиц Firefly, каждая из которых кодирует отдельный тип микроРНК, позволяет получить информацию о содержании до 68 типов микроРНК в каждой лунке 96-луночного планшета с 20-кратной репликацией.

Концевые участки для идентификации типов частиц: два участка содержат флуоресцентный краситель Cy®3 с различной интенсивностью флуоресценции; каждая из частиц, содержащая уникальный комплементарный к микро-РНК участок, имеет разную интенсивность флуоресценции. Центральный (аналитный) участок: содержит зонды к специфичной целевой микро-РНК; захваченная целевая РНК красится флуоресцентными красителями PE-Cy5; интенсивность свечения этого региона пропорционально концентрации микро-РНК в лунке.

Технология Firefly основана на использовании технологии кодирующих микрочастиц , что обеспечивает возможность мультиплексирования при анализе микро-РНК на стандартном проточном цитофлуориметре. Данный подход позволяет детектировать до 68 мишеней в одной лунке.

Дополнительная нформация:

• Онкология;
• Исследования стволовых клеток;
• Сердечно-сосудистые заболевания;
• Иммунология.

Преимущества метода:

• Простота: не требует мучительного выделения РНК из образцов;
• Быстрый: подготовка к анализу всего за 1 час;
• Высокая чувствительность сопоставимая с ПЦР-анализом;
• Открытость наборов: наборы Firefly можно использовать на любых проточных цитофлуориметрах с каналами детекции по Cy-3, Cy-5 и PE;
• Мультиплексность: детекция до 68 аналитов в 1 лунке;
• Высокая точность: каждая микроРНК детектируется несколькими типами частиц, что обеспечивает перекрытие данных по нескольким частицам.

Частицы Firefly выполнены из биоинертного гидрофобного пластичного материала и имеют размер 220 x 40 x 40 мкм. Такая форма и размер позволяет частицам беспроблемно проходить через проточные ячейки любых проточных цитофлуориметров. Материал частиц легко разрушается гидроксидом натрия, что позволяет без особых усилий при необходимости промыть ячейку.

Каждая частица содержит три различных функциональных области, каждая из которых отделена инертными спейсерами. В центральной области частицы содержаться РНК-зонды, комплиментарные к целевой микро-РНК. Два концевых участка исполняют кодирующую функцию.

Проточный цитофлуориметр детектирует каждую частицу как серию трёх сигналов.

При прохождении частицы через проточную ячейку проточного цитоофлуориметра, прибор детектирует серию из 3х сигналов от каждой частицы и определяет интенсивность сигнала.

Декодирование типа частицы и уровня сигнала осуществляется специализированным ПО.

Программное обеспечение Firefly Analysis Workbench использует полученные данные для декодировния типа частицы и определения уровня микро РНК в пробе.

Интенсивность флуоресценции фикоэритрина (PE)-Cy5 из центрального участка определяет содержание той или иной микро РНК.

Проточный цитофлуориметр детектирует уровень сигнала центрального участка частицы. Интенсивность сигнала прямо пропорциональна уровню мкроРНК в образце.

Технология Firefly позволяет определять содержание до 68 микроРНК в одной лунке. Смесь частиц Firefly, каждая из которых кодирует отдельный тип микроРНК, позволяет получить информацию о содержании до 68 типов микроРНК в каждой лунке 96-луночного планшета с 20-кратной репликацией.

Концевые участки для идентификации типов частиц: два участка содержат флуоресцентный краситель Cy®3 с различной интенсивностью флуоресценции; каждая из частиц, содержащая уникальный комплементарный к микро-РНК участок, имеет разную интенсивность флуоресценции. Центральный (аналитный) участок: содержит зонды к специфичной целевой микро-РНК; захваченная целевая РНК красится флуоресцентными красителями PE-Cy5; интенсивность свечения этого региона пропорционально концентрации микро-РНК в лунке.

Технология Firefly основана на использовании технологии кодирующих микрочастиц , что обеспечивает возможность мультиплексирования при анализе микро-РНК на стандартном проточном цитофлуориметре. Данный подход позволяет детектировать до 68 мишеней в одной лунке.

Дополнительная нформация:

• Онкология;
• Исследования стволовых клеток;
• Сердечно-сосудистые заболевания;
• Иммунология.

Преимущества метода:

• Простота: не требует мучительного выделения РНК из образцов;
• Быстрый: подготовка к анализу всего за 1 час;
• Высокая чувствительность сопоставимая с ПЦР-анализом;
• Открытость наборов: наборы Firefly можно использовать на любых проточных цитофлуориметрах с каналами детекции по Cy-3, Cy-5 и PE;
• Мультиплексность: детекция до 68 аналитов в 1 лунке;
• Высокая точность: каждая микроРНК детектируется несколькими типами частиц, что обеспечивает перекрытие данных по нескольким частицам.

Частицы Firefly выполнены из биоинертного гидрофобного пластичного материала и имеют размер 220 x 40 x 40 мкм. Такая форма и размер позволяет частицам беспроблемно проходить через проточные ячейки любых проточных цитофлуориметров. Материал частиц легко разрушается гидроксидом натрия, что позволяет без особых усилий при необходимости промыть ячейку.

Каждая частица содержит три различных функциональных области, каждая из которых отделена инертными спейсерами. В центральной области частицы содержаться РНК-зонды, комплиментарные к целевой микро-РНК. Два концевых участка исполняют кодирующую функцию.

Проточный цитофлуориметр детектирует каждую частицу как серию трёх сигналов.

При прохождении частицы через проточную ячейку проточного цитоофлуориметра, прибор детектирует серию из 3х сигналов от каждой частицы и определяет интенсивность сигнала.

Декодирование типа частицы и уровня сигнала осуществляется специализированным ПО.

Программное обеспечение Firefly Analysis Workbench использует полученные данные для декодировния типа частицы и определения уровня микро РНК в пробе.

Интенсивность флуоресценции фикоэритрина (PE)-Cy5 из центрального участка определяет содержание той или иной микро РНК.

Проточный цитофлуориметр детектирует уровень сигнала центрального участка частицы. Интенсивность сигнала прямо пропорциональна уровню мкроРНК в образце.

Технология Firefly позволяет определять содержание до 68 микроРНК в одной лунке. Смесь частиц Firefly, каждая из которых кодирует отдельный тип микроРНК, позволяет получить информацию о содержании до 68 типов микроРНК в каждой лунке 96-луночного планшета с 20-кратной репликацией.

Концевые участки для идентификации типов частиц: два участка содержат флуоресцентный краситель Cy®3 с различной интенсивностью флуоресценции; каждая из частиц, содержащая уникальный комплементарный к микро-РНК участок, имеет разную интенсивность флуоресценции. Центральный (аналитный) участок: содержит зонды к специфичной целевой микро-РНК; захваченная целевая РНК красится флуоресцентными красителями PE-Cy5; интенсивность свечения этого региона пропорционально концентрации микро-РНК в лунке.

Технология Firefly основана на использовании технологии кодирующих микрочастиц , что обеспечивает возможность мультиплексирования при анализе микро-РНК на стандартном проточном цитофлуориметре. Данный подход позволяет детектировать до 68 мишеней в одной лунке.

Дополнительная нформация:

• Онкология;
• Исследования стволовых клеток;
• Сердечно-сосудистые заболевания;
• Иммунология.

Преимущества метода:

• Простота: не требует мучительного выделения РНК из образцов;
• Быстрый: подготовка к анализу всего за 1 час;
• Высокая чувствительность сопоставимая с ПЦР-анализом;
• Открытость наборов: наборы Firefly можно использовать на любых проточных цитофлуориметрах с каналами детекции по Cy-3, Cy-5 и PE;
• Мультиплексность: детекция до 68 аналитов в 1 лунке;
• Высокая точность: каждая микроРНК детектируется несколькими типами частиц, что обеспечивает перекрытие данных по нескольким частицам.

Частицы Firefly выполнены из биоинертного гидрофобного пластичного материала и имеют размер 220 x 40 x 40 мкм. Такая форма и размер позволяет частицам беспроблемно проходить через проточные ячейки любых проточных цитофлуориметров. Материал частиц легко разрушается гидроксидом натрия, что позволяет без особых усилий при необходимости промыть ячейку.

Каждая частица содержит три различных функциональных области, каждая из которых отделена инертными спейсерами. В центральной области частицы содержаться РНК-зонды, комплиментарные к целевой микро-РНК. Два концевых участка исполняют кодирующую функцию.

Проточный цитофлуориметр детектирует каждую частицу как серию трёх сигналов.

При прохождении частицы через проточную ячейку проточного цитоофлуориметра, прибор детектирует серию из 3х сигналов от каждой частицы и определяет интенсивность сигнала.

Декодирование типа частицы и уровня сигнала осуществляется специализированным ПО.

Программное обеспечение Firefly Analysis Workbench использует полученные данные для декодировния типа частицы и определения уровня микро РНК в пробе.

Интенсивность флуоресценции фикоэритрина (PE)-Cy5 из центрального участка определяет содержание той или иной микро РНК.

Проточный цитофлуориметр детектирует уровень сигнала центрального участка частицы. Интенсивность сигнала прямо пропорциональна уровню мкроРНК в образце.

Технология Firefly позволяет определять содержание до 68 микроРНК в одной лунке. Смесь частиц Firefly, каждая из которых кодирует отдельный тип микроРНК, позволяет получить информацию о содержании до 68 типов микроРНК в каждой лунке 96-луночного планшета с 20-кратной репликацией.

Концевые участки для идентификации типов частиц: два участка содержат флуоресцентный краситель Cy®3 с различной интенсивностью флуоресценции; каждая из частиц, содержащая уникальный комплементарный к микро-РНК участок, имеет разную интенсивность флуоресценции. Центральный (аналитный) участок: содержит зонды к специфичной целевой микро-РНК; захваченная целевая РНК красится флуоресцентными красителями PE-Cy5; интенсивность свечения этого региона пропорционально концентрации микро-РНК в лунке.

Технология Firefly основана на использовании технологии кодирующих микрочастиц , что обеспечивает возможность мультиплексирования при анализе микро-РНК на стандартном проточном цитофлуориметре. Данный подход позволяет детектировать до 68 мишеней в одной лунке.

Дополнительная нформация:

• Онкология;
• Исследования стволовых клеток;
• Сердечно-сосудистые заболевания;
• Иммунология.

Преимущества метода:

• Простота: не требует мучительного выделения РНК из образцов;
• Быстрый: подготовка к анализу всего за 1 час;
• Высокая чувствительность сопоставимая с ПЦР-анализом;
• Открытость наборов: наборы Firefly можно использовать на любых проточных цитофлуориметрах с каналами детекции по Cy-3, Cy-5 и PE;
• Мультиплексность: детекция до 68 аналитов в 1 лунке;
• Высокая точность: каждая микроРНК детектируется несколькими типами частиц, что обеспечивает перекрытие данных по нескольким частицам.

Частицы Firefly выполнены из биоинертного гидрофобного пластичного материала и имеют размер 220 x 40 x 40 мкм. Такая форма и размер позволяет частицам беспроблемно проходить через проточные ячейки любых проточных цитофлуориметров. Материал частиц легко разрушается гидроксидом натрия, что позволяет без особых усилий при необходимости промыть ячейку.

Каждая частица содержит три различных функциональных области, каждая из которых отделена инертными спейсерами. В центральной области частицы содержаться РНК-зонды, комплиментарные к целевой микро-РНК. Два концевых участка исполняют кодирующую функцию.

Проточный цитофлуориметр детектирует каждую частицу как серию трёх сигналов.

При прохождении частицы через проточную ячейку проточного цитоофлуориметра, прибор детектирует серию из 3х сигналов от каждой частицы и определяет интенсивность сигнала.

Декодирование типа частицы и уровня сигнала осуществляется специализированным ПО.

Программное обеспечение Firefly Analysis Workbench использует полученные данные для декодировния типа частицы и определения уровня микро РНК в пробе.

Интенсивность флуоресценции фикоэритрина (PE)-Cy5 из центрального участка определяет содержание той или иной микро РНК.

Проточный цитофлуориметр детектирует уровень сигнала центрального участка частицы. Интенсивность сигнала прямо пропорциональна уровню мкроРНК в образце.

Технология Firefly позволяет определять содержание до 68 микроРНК в одной лунке. Смесь частиц Firefly, каждая из которых кодирует отдельный тип микроРНК, позволяет получить информацию о содержании до 68 типов микроРНК в каждой лунке 96-луночного планшета с 20-кратной репликацией.

Концевые участки для идентификации типов частиц: два участка содержат флуоресцентный краситель Cy®3 с различной интенсивностью флуоресценции; каждая из частиц, содержащая уникальный комплементарный к микро-РНК участок, имеет разную интенсивность флуоресценции. Центральный (аналитный) участок: содержит зонды к специфичной целевой микро-РНК; захваченная целевая РНК красится флуоресцентными красителями PE-Cy5; интенсивность свечения этого региона пропорционально концентрации микро-РНК в лунке.

Технология Firefly основана на использовании технологии кодирующих микрочастиц , что обеспечивает возможность мультиплексирования при анализе микро-РНК на стандартном проточном цитофлуориметре. Данный подход позволяет детектировать до 68 мишеней в одной лунке.

Дополнительная нформация:

• Онкология;
• Исследования стволовых клеток;
• Сердечно-сосудистые заболевания;
• Иммунология.

Преимущества метода:

• Простота: не требует мучительного выделения РНК из образцов;
• Быстрый: подготовка к анализу всего за 1 час;
• Высокая чувствительность сопоставимая с ПЦР-анализом;
• Открытость наборов: наборы Firefly можно использовать на любых проточных цитофлуориметрах с каналами детекции по Cy-3, Cy-5 и PE;
• Мультиплексность: детекция до 68 аналитов в 1 лунке;
• Высокая точность: каждая микроРНК детектируется несколькими типами частиц, что обеспечивает перекрытие данных по нескольким частицам.

Частицы Firefly выполнены из биоинертного гидрофобного пластичного материала и имеют размер 220 x 40 x 40 мкм. Такая форма и размер позволяет частицам беспроблемно проходить через проточные ячейки любых проточных цитофлуориметров. Материал частиц легко разрушается гидроксидом натрия, что позволяет без особых усилий при необходимости промыть ячейку.

Каждая частица содержит три различных функциональных области, каждая из которых отделена инертными спейсерами. В центральной области частицы содержаться РНК-зонды, комплиментарные к целевой микро-РНК. Два концевых участка исполняют кодирующую функцию.

Проточный цитофлуориметр детектирует каждую частицу как серию трёх сигналов.

При прохождении частицы через проточную ячейку проточного цитоофлуориметра, прибор детектирует серию из 3х сигналов от каждой частицы и определяет интенсивность сигнала.

Декодирование типа частицы и уровня сигнала осуществляется специализированным ПО.

Программное обеспечение Firefly Analysis Workbench использует полученные данные для декодировния типа частицы и определения уровня микро РНК в пробе.

Интенсивность флуоресценции фикоэритрина (PE)-Cy5 из центрального участка определяет содержание той или иной микро РНК.

Проточный цитофлуориметр детектирует уровень сигнала центрального участка частицы. Интенсивность сигнала прямо пропорциональна уровню мкроРНК в образце.

Технология Firefly позволяет определять содержание до 68 микроРНК в одной лунке. Смесь частиц Firefly, каждая из которых кодирует отдельный тип микроРНК, позволяет получить информацию о содержании до 68 типов микроРНК в каждой лунке 96-луночного планшета с 20-кратной репликацией.

Концевые участки для идентификации типов частиц: два участка содержат флуоресцентный краситель Cy®3 с различной интенсивностью флуоресценции; каждая из частиц, содержащая уникальный комплементарный к микро-РНК участок, имеет разную интенсивность флуоресценции. Центральный (аналитный) участок: содержит зонды к специфичной целевой микро-РНК; захваченная целевая РНК красится флуоресцентными красителями PE-Cy5; интенсивность свечения этого региона пропорционально концентрации микро-РНК в лунке.

Технология Firefly основана на использовании технологии кодирующих микрочастиц , что обеспечивает возможность мультиплексирования при анализе микро-РНК на стандартном проточном цитофлуориметре. Данный подход позволяет детектировать до 68 мишеней в одной лунке.

Дополнительная нформация:

• Онкология;
• Исследования стволовых клеток;
• Сердечно-сосудистые заболевания;
• Иммунология.

Преимущества метода:

• Простота: не требует мучительного выделения РНК из образцов;
• Быстрый: подготовка к анализу всего за 1 час;
• Высокая чувствительность сопоставимая с ПЦР-анализом;
• Открытость наборов: наборы Firefly можно использовать на любых проточных цитофлуориметрах с каналами детекции по Cy-3, Cy-5 и PE;
• Мультиплексность: детекция до 68 аналитов в 1 лунке;
• Высокая точность: каждая микроРНК детектируется несколькими типами частиц, что обеспечивает перекрытие данных по нескольким частицам.

Частицы Firefly выполнены из биоинертного гидрофобного пластичного материала и имеют размер 220 x 40 x 40 мкм. Такая форма и размер позволяет частицам беспроблемно проходить через проточные ячейки любых проточных цитофлуориметров. Материал частиц легко разрушается гидроксидом натрия, что позволяет без особых усилий при необходимости промыть ячейку.

Каждая частица содержит три различных функциональных области, каждая из которых отделена инертными спейсерами. В центральной области частицы содержаться РНК-зонды, комплиментарные к целевой микро-РНК. Два концевых участка исполняют кодирующую функцию.

Проточный цитофлуориметр детектирует каждую частицу как серию трёх сигналов.

При прохождении частицы через проточную ячейку проточного цитоофлуориметра, прибор детектирует серию из 3х сигналов от каждой частицы и определяет интенсивность сигнала.

Декодирование типа частицы и уровня сигнала осуществляется специализированным ПО.

Программное обеспечение Firefly Analysis Workbench использует полученные данные для декодировния типа частицы и определения уровня микро РНК в пробе.

Интенсивность флуоресценции фикоэритрина (PE)-Cy5 из центрального участка определяет содержание той или иной микро РНК.

Проточный цитофлуориметр детектирует уровень сигнала центрального участка частицы. Интенсивность сигнала прямо пропорциональна уровню мкроРНК в образце.

Технология Firefly позволяет определять содержание до 68 микроРНК в одной лунке. Смесь частиц Firefly, каждая из которых кодирует отдельный тип микроРНК, позволяет получить информацию о содержании до 68 типов микроРНК в каждой лунке 96-луночного планшета с 20-кратной репликацией.

Концевые участки для идентификации типов частиц: два участка содержат флуоресцентный краситель Cy®3 с различной интенсивностью флуоресценции; каждая из частиц, содержащая уникальный комплементарный к микро-РНК участок, имеет разную интенсивность флуоресценции. Центральный (аналитный) участок: содержит зонды к специфичной целевой микро-РНК; захваченная целевая РНК красится флуоресцентными красителями PE-Cy5; интенсивность свечения этого региона пропорционально концентрации микро-РНК в лунке.

Технология Firefly основана на использовании технологии кодирующих микрочастиц , что обеспечивает возможность мультиплексирования при анализе микро-РНК на стандартном проточном цитофлуориметре. Данный подход позволяет детектировать до 68 мишеней в одной лунке.

Дополнительная нформация:

• Онкология;
• Исследования стволовых клеток;
• Сердечно-сосудистые заболевания;
• Иммунология.

Преимущества метода:

• Простота: не требует мучительного выделения РНК из образцов;
• Быстрый: подготовка к анализу всего за 1 час;
• Высокая чувствительность сопоставимая с ПЦР-анализом;
• Открытость наборов: наборы Firefly можно использовать на любых проточных цитофлуориметрах с каналами детекции по Cy-3, Cy-5 и PE;
• Мультиплексность: детекция до 68 аналитов в 1 лунке;
• Высокая точность: каждая микроРНК детектируется несколькими типами частиц, что обеспечивает перекрытие данных по нескольким частицам.

Частицы Firefly выполнены из биоинертного гидрофобного пластичного материала и имеют размер 220 x 40 x 40 мкм. Такая форма и размер позволяет частицам беспроблемно проходить через проточные ячейки любых проточных цитофлуориметров. Материал частиц легко разрушается гидроксидом натрия, что позволяет без особых усилий при необходимости промыть ячейку.

Каждая частица содержит три различных функциональных области, каждая из которых отделена инертными спейсерами. В центральной области частицы содержаться РНК-зонды, комплиментарные к целевой микро-РНК. Два концевых участка исполняют кодирующую функцию.

Проточный цитофлуориметр детектирует каждую частицу как серию трёх сигналов.

При прохождении частицы через проточную ячейку проточного цитоофлуориметра, прибор детектирует серию из 3х сигналов от каждой частицы и определяет интенсивность сигнала.

Декодирование типа частицы и уровня сигнала осуществляется специализированным ПО.

Программное обеспечение Firefly Analysis Workbench использует полученные данные для декодировния типа частицы и определения уровня микро РНК в пробе.

Интенсивность флуоресценции фикоэритрина (PE)-Cy5 из центрального участка определяет содержание той или иной микро РНК.

Проточный цитофлуориметр детектирует уровень сигнала центрального участка частицы. Интенсивность сигнала прямо пропорциональна уровню мкроРНК в образце.

Технология Firefly позволяет определять содержание до 68 микроРНК в одной лунке. Смесь частиц Firefly, каждая из которых кодирует отдельный тип микроРНК, позволяет получить информацию о содержании до 68 типов микроРНК в каждой лунке 96-луночного планшета с 20-кратной репликацией.

Концевые участки для идентификации типов частиц: два участка содержат флуоресцентный краситель Cy®3 с различной интенсивностью флуоресценции; каждая из частиц, содержащая уникальный комплементарный к микро-РНК участок, имеет разную интенсивность флуоресценции. Центральный (аналитный) участок: содержит зонды к специфичной целевой микро-РНК; захваченная целевая РНК красится флуоресцентными красителями PE-Cy5; интенсивность свечения этого региона пропорционально концентрации микро-РНК в лунке.

Набор для определения апоптотических клеток содержит все необходимые реагенты для мечения апоптотических и некротических клеток с помощью аннексина V, конъюгированного с AF488, и йодистого пропидия.

AF488 — сульфированный родамин, яркий, фотостабильный и гидрофильный флуорофор. Краситель излучает в зеленом (FITC) канале.

• Максимум поглощения, нм — 495;
• максимум эмиссии, нм — 519.

Йодистый пропидий (PI) — непроницаемый через плазматическую мембрану ДНК-краситель, позволяющий различать популяции некротических, апоптотических и здоровых клеток на основе целостности мембраны. После связывания с ДНК краситель излучает в оранжево-красном канале.

• Максимум поглощения, нм — 535;
• максимум эмиссии, нм — 617.

Состав набора для определения апоптотических клеток с помощью аннексина V-AF488

• Аннексин V, AF488 конъюгат, мкг – 5;
• Propidium Iodide solution, 0,1 мг/мл, мкл – 100;
• Annexin V Binding Buffer, 5x, мл – 15.

Условия транспортировки и хранения

• Транспортировка – до трех недель при комнатной температуре;
• хранение, °С – -20°С;
• срок хранения – 12 месяцев.

Рекомендуемые концентрации аннексина V-AF488 — от 2 до 5 мкг/мл, в зависимости от исследуемой клеточной культуры. Перед экспериментом необходимо опробовать разные разведения аннексина V-AF488 для определения оптимальной концентрации.

Окрашивание с помощью йодистого пропидия — опционально. Этот этап можно пропустить, если в задачах нет необходимости исследовать некроз.

Важно! Аннексин V можно использовать в качестве маркера апоптоза только в клетках с интактной плазматической мембраной. При нарушении целостности плазматической мембраны аннексин V может связываться с ФС внутри клетки и давать ложноположительный результат.

Применение набора для определения апоптотических клеток с помощью аннексина V-AF488

Приготовление растворов

1. Растворите содержимое пробирки с лиофилизированным аннексином V-AF488 в 250 мкл деионизованной воды.

Важно! Разведенный рекомбинантный белок необходимо хранить защищенным от света при температуре 2-8°C. В растворе конъюгат стабилен в течение месяца. При длительных экспериментах рекомендуется приготовить аликвоты и хранить их при температуре −20°С. Избегать повторного замораживания!

2. Приготовьте необходимый объём 1х буфера для связывания, смешав 1 часть 5х буфера для связывания с 4 частями деионизованной воды.

Окрашивание клеток

1. Адгезированные клетки аккуратно снимите с поверхности роста подходящим способом. С суспензионными клетками начинайте работу со следующего пункта.2. Промойте клетки один раз охлаждённым PBS (рН7.4) и один раз 1х буфером для связывания.

3. Ресуспензируйте клетки в холодном 1х буфере для связывания.

4. Отберите 100 мкл суспензии клеток (от 1×105 до 1×106 клеток/мл) в микроцентрифужные пробирки объемом 1.5 мл. Для проточной цитометрии необходимо заготовить дополнительные пробирки с соответствующими контролями (см. описание контролей ниже).

5. Добавьте 2-5 мкл раствора аннексина V-AF488 в каждую пробирку, инкубируйте в течение 10-15 мин при комнатной температуре в защищенном от света месте.

6. Без предварительной отмывки добавьте 400 мкл 1x буфера для связывания в каждую пробирку.

7. (Опционально) Добавьте 5 мкл йодистого пропидия в каждую пробирку с клетками. Аккуратно перемешайте содержимое пробирки и инкубируйте в течение 5 мин при комнатной температуре в защищенном от света месте.

Важно! Не промывайте клетки от йодистого пропидия. Йодистый пропидий должен оставаться в буфере во время сбора данных.

8. Окрашенные клетки храните при температуре 2-8°C в защищенном от света месте до проведения анализа.

Важно! Количественное определение клеток методом проточной цитометрии или флуоресцентной микроскопии необходимо производить в течение 4 ч от начала окрашивания из-за негативного воздействия йодидистого пропидия на жизнеспособность клеток.

Проточная цитометрия

1. Для цитофлуориметрического анализа апоптоза и некроза клеток с помощью аннексина V-AF488 и йодистого пропидия помимо целевого окрашивания необходимо приготовить контроли: неокрашенные клетки (отрицательный контроль для настройки прибора); клетки, окрашенные только аннексином V-AF488, и клетки, окрашенные только йодистым пропидием (для настройки компенсации).

2. Анализ связывания аннексина V-AF488 проводят с использованием детектора сигнала FITC.

3. Анализ клеток, окрашенных йодистым пропидием, осуществляют с помощью детектора сигнала фикоэритрина.

Флуоресцентная микроскопия

1. Отберите каплю суспензии с окрашенными клетками и поместите ее на предметное стекло. Накройте клетки покровным стеклом.

2. В качестве альтернативы, адгезированные клетки можно окрашивать непосредственно на покровном стекле. После окрашивания переверните покровное стекло на предметное, так, чтобы клетки находились между предметным и покровным стёклами.

3. (Опционально) Клетки после окрашивания аннексином V, перед визуализацией можно промыть 1х буфером для связывания и зафиксировать в 2% параформальдегиде. Не фиксируйте клетки перед инкубацией с аннексином V-AF488, поскольку любое нарушение клеточной мембраны может вызвать неспецифическое связывание аннексина V с ФС на внутренней поверхности клеточной мембраны.

4. Исследование клеток под флуоресцентным микроскопом осуществляют, используя двойной набор фильтров для FITC и родамина.

Результат окрашивания

• Ранние апоптотические клетки, связавшие аннексин V-AF488, окрашиваются в зеленый цвет в плазматической мембране.
• Некротические клетки в результате проникновения йодистого пропидия внутрь клетки будут окрашены красным.
• Апоптотические клетки с нарушенной в результате вторичного некроза целостностью мембраны будут иметь красное окрашивание (йодистый пропидий) и ореол зеленого окрашивания (AF488) на клеточной поверхности (плазматическая мембрана).
• Здоровые клетки будут лишены окрашивания.