ДНК-полимераза Phusion является золотым стандартом для высокопроизводительной ПЦР. Частота ошибок у этой полимеразы – более чем в 50 раз ниже, чем у стандартной
Taq ДНК-полимеразы и в 6 раз ниже, чем у
Pfu.
ДНК-полимераза Phusion – наилучший выбор для клонирования и других экспериментов, требующих высокой точности при синтезе ДНК. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов.
Мастер-микс для ПЦР Phusion – это 2-кратная готовая реакционная смесь для ПЦР, содержащая ДНК-полимеразу Phusion, дезоксинуклеотидтрифосфаты (400 мкМ каждого) и оптимизированный буфер HF с MgCl₂ (1,5 мМ в конечной концентрации). Это удобный формат для постановки ПЦР, позволяющий экономить время и снизить число пипетирований, уменьшая тем самым риск ошибки.
Мастер-микс Phusion предлагается в 2 вариантах – с буфером HF и с буфером GC. Мастер-микс с буфером HF рекомендуется использовать для ПЦР с максимальной точностью. В буфере GC точность полимеразы Phusion снижается примерно в 2 раза, поэтому его рекомендуется использовать только в случае проблем с амплификацией сложных структур в HF-буфере.
ДНК-полимераза Phusion синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.
Кроме самого мастер-микса, в состав комплекта входит пробирка с ДМСО.
Условия хранения - 20 °С.
Особенности ДНК-полимеразы Phusion:
- высокая точность синтеза (в 52 раза выше по сравнению с Taq);
-
более высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
-
универсальность – практически не требуется оптимизация условий ПЦР;
-
больший выход ПЦР-продукта при минимальном количестве фермента.
Области применения:
- высокоточная ПЦР;
-
клонирование;
-
синтез ДНК для секвенирования;
-
амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
- ПЦР длинных фрагментов (до 20 тыс. п.н.);
-
сайт-специфический мутагенез;
-
высокопроизводительная ПЦР;
-
получение микрочипов.