Ферменты

Превосходная специфичность;
высокий выход продукта;
для амплификации длинных продуктов — до 37 000 н.п.;
высокая скорость — за 15–30 секунд синтезируется 1000 н.п.;
быстрый протокол — 30 мин;
расход — 0,25–1 ед/реак; подготовка реакции при комнатной температуре.

Pfu ДНК-полимераза высокоточная — это термостабильный фермент, выделенный из штамма E. сoli, содержащего клонированный ген из Pyrococcus furiosus.

Фермент катализирует матричный синтез ДНК путем полимеризации нуклеотидов в направлении 5'→3' в присутствии ионов магния, обладает 3'→5' экзонуклеазной (корректирующей) активностью, что позволяет ферменту вести точный синтез ДНК, устраняя неправильно включенные основания с помощью корректирующей активности. Pfu ДНК-полимераза синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.

Особенности Pfu ДНК-полимеразы

• 3'-5' экзонуклеазная активность обеспечивает более точный синтез ДНК;
• высокая термостабильность;
• синтез ПЦР-продуктов с тупыми концами.

Применение Pfu ДНК-полимеразы

• Высокоточная ПЦР;
• получение ПЦР-продуктов для клонирования;
• сайт-направленный мутагенез.

Комплект поставки: Pfu ДНК-полимераза, 10х буфер для проведения реакции.

Условия хранения: -20 °С.

ДНК-полимераза Phusion является золотым стандартом для высокпроизводительной ПЦР. Частота ошибок у этой полимеразы более чем в 50 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы, и в 6 раз ниже, чем у Pfu. ДНК-полимераза Phusion – наилучший выбор для клонирования и других экспериментов, требующих высокой точности при синтезе ДНК. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов.

Использование для ПЦР ДНК-полимеразы с горячим стартом Phusion Hot Start II исключает возможность синтеза неспецифических продуктов в процессе подготовки ПЦР-смесей. Это происходит благодаря комбинации фермента со специфическим лигандом Affibody, ингибирующим активность полимеразы при комнатной температуре. Этот лиганд также ингибирует 3’→5’ экзонуклеазную активность, предотвращая деградацию праймеров и матрицы. При нагревании реакционной смеси до определённой температуры в ходе ПЦР лиганд быстро отщепляется от полимеразы, поэтому в протоколе реакции не требуется специальная стадия активации фермента.

Наборы Phusion Green Hot Start II комплектуются 5-кратными буферами Phusion Green, содержащими утяжеляющий агент и два маркерных красителя. Это позволяет наносить продукты ПЦР на гель без добавления дополнительных реактивов для электрофореза. Утяжеляющий агент и маркерные красители инертны, не влияют на ПЦР и не мешают использованию ПЦР-продуктов в реакциях лигирования или рестрикции, а также при секвенировании.

ДНК-полимераза Phusion Hot Start II синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности ДНК-полимеразы Phusion Green Hot Start II:

• высокая точность синтеза (в 52 раза выше по сравнению с Taq);
• возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре;
• отсутствие неспецифического синтеза и деградации праймеров в процессе подготовки ПЦР;
• быстрая ре-активация полимеразы при запуске ПЦР;
• более высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• универсальность – практически не требуется оптимизация условий ПЦР;
• больший выход ПЦР-продукта при минимальном количестве фермента;
• возможность нанесения ПЦР-продуктов на гель без добавления специальных реагентов для электрофореза.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• ПЦР длинных фрагментов (до 20 тыс. п.н.);
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мультиплексная ПЦР;
• получение микрочипов.

В состав набора входят:

ДНК-полимераза Phusion является золотым стандартом для высокопроизводительной ПЦР. Частота ошибок у этой полимеразы – более чем в 50 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы и в 6 раз ниже, чем у Pfu. ДНК-полимераза Phusion – наилучший выбор для клонирования и других экспериментов, требующих высокой точности при синтезе ДНК. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов.

ДНК-полимераза Phusion синтезирует фрагменты ДНК с тупыми концами.

Наборы Phusion Green комплектуются 5-кратными буферами Phusion Green, содержащими утяжеляющий агент и два маркерных красителя. Это позволяет наносить продукты ПЦР на гель без добавления дополнительных реактивов для электрофореза. Утяжеляющий агент и маркерные красители инертны, не влияют на ПЦР и не мешают использованию ПЦР-продуктов в реакциях лигирования или рестрикции, а также при секвенировании.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности ДНК-полимеразы Phusion:

• высокая точность синтеза (в 52 раза выше по сравнению с Taq);
• более высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• универсальность – практически не требуется оптимизация условий ПЦР;
• больший выход ПЦР-продукта при минимальном количестве фермента.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• ПЦР длинных фрагментов (до 20 тыс. п.н.);
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• получение микрочипов.

В состав набора входят:

ДНК-полимераза Phusion является золотым стандартом для высокопроизводительной ПЦР. Частота ошибок у этой полимеразы более чем в 50 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы, и в 6 раз ниже, чем у Pfu. ДНК-полимераза Phusion – наилучший выбор для клонирования и других экспериментов, требующих высокой точности при синтезе ДНК. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов.

Использование для ПЦР ДНК-полимеразы с горячим стартом Phusion Hot Start II исключает возможность синтеза неспецифических продуктов в процессе подготовки ПЦР-смесей. Это происходит благодаря комбинации фермента со специфическим лигандом Affibody, ингибирующим активность полимеразы при комнатной температуре. Этот лиганд также ингибирует 3’→5’ экзонуклеазную активность, предотвращая деградацию праймеров и матрицы. При нагревании реакционной смеси до определённой температуры в ходе ПЦР лиганд быстро отщепляется от полимеразы, поэтому в протоколе реакции не требуется специальная стадия активации фермента.

Также возможна комплектация с буфером Green, содержащим утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР).

ДНК-полимераза Phusion Hot Start II синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности ДНК-полимеразы Phusion Hot Start II:

• высокая точность синтеза (в 52 раза выше по сравнению с Taq);
• возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре;
• отсутствие неспецифического синтеза и деградации праймеров в процессе подготовки ПЦР;
• быстрая ре-активация полимеразы при запуске ПЦР;
• более высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• универсальность – практически не требуется оптимизация условий ПЦР;
• больший выход ПЦР-продукта при минимальном количестве фермента.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• ПЦР длинных фрагментов (до 20 тыс. п.н.);
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мультиплексная ПЦР;
• получение микрочипов.

В состав набора входят:

• ДНК-полимераза Phusion Hot Start II (2 Ед/мкл);
• 5Х буфер Phusion HF*;
• 5Х буфер Phusion GC*;
• ДМСО;
• 50 мМ MgCl_₂.

* в состав 5Х буферов Phusion уже входит 7,5 мМ MgCl₂.

ДНК-полимераза Phusion Plus Thermo FS представляет собой высокоточную ДНК-полимеразу, которая имеет очень низкую частоту ошибок, быструю скорость элонгации и высокую устойчивость к ингибиторам. Частота ошибок у Phusion Plus ДНК-полимеразы более чем в 100 раз ниже, чем у Taq ДНК-полимеразы. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов, например, таких как ксилан, гуминовая кислота, гемин.

Новый реакционный буфер Phusion Plus включает запатентованные добавки, которые стабилизируют дуплексы праймера/матрицы во время стадии отжига при 60 °C. Эта уникальная буферная композиция повышает специфичность ПЦР без необходимости оптимизации температуры отжига для каждой пары праймеров, помогая экономить время и избегать ошибок при выполнении ПЦР. Кроме того, при проведении ПЦР с помощью ДНК-полимеразы Phusion Plus есть возможность совместной амплификации фрагментов ДНК разной длины с использованием одного и того же протокола.

ДНК-полимераза Phusion Plus неактивна при комнатной температуре благодаря ее механизму горячего старта, опосредованному молекулами Affibody, что позволяет проводить подготовку реакционной смеси при комнатной температуре. Активность фермента полностью восстанавливается после начальной стадии денатурации.

ДНК-полимераза Phusion Plus идеальна для применений, где важна точность, таких как клонирование, секвенирование, сайт-направленный мутагенез.

Преимущества Phusion Plus ДНК-полимеразы:

• в 100 раз большая точность синтеза, чем у Taq ДНК-полимеразы;
• универсальная температура отжига 60 °C;
• повышенная специфичность — механизм горячего старта снижает неспецифическую амплификацию и деградацию праймеров;
• высокая устойчивость к ингибиторам — работает с ДНК неоптимальной чистоты;
• обладает 5' →3' ДНК-полимеразной активностью;
• обладает 3' →5' экзонуклеазной активностью;
• обнаруживает мишени из 0,08 нг геномной ДНК человека;
• амплифицирует ПЦР-продукты с тупыми концами;
• возможность совместной амплификации фрагментов ДНК разной длины;
• амплифицирует до 10 тыс. п.о. геномной ДНК и до 20 тыс. п.о. фрагментов ДНК низкой сложности;
• работает как с AT, так и с GC богатыми мишенями (GC Phusion enhancer обеспечивает синтез мишений с содержанием GC более 65%);
• обладает скоростью синтеза 15-30 сек/kb.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для севенирования;
• синтез GC-богатых участков ДНК;
• амплификация длинных фрагментов (до 20 тыс. п.о.);
• сайт-специфический ПЦР;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мультиплексная ПЦР.

Условия хранения — 20°С.

ДНК-полимераза Phusion U Hot Start – новая термостабильная ДНК-полимераза, полученная генно-инженерным путём. Благодаря внесению модификации в дНТФ-связывающий карман полимеразы Phusion было снято ограничение, характерное для высокоточных полимераз – неспособность встраивать дезоксиурацилтрифосфат. Phusion U способна как встраивать урациловый остаток, так и считывать его в ДНК-матрице.

Помимо этого, Phusion U обладает всеми характеристиками ДНК-полимераз Phusion – точностью, скоростью, способностью синтезировать длинные последовательности (до 20 тыс. п.н.). Частота ошибок у полимеразы Phusion U в 25 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы. Встроенная функция горячего старта реализуется благодаря комбинации фермента со специфическим лигандом Affibody, ингибирующим полимеразную и 3’→5’ экзонуклеазную активности при комнатной температуре.

Эти особенности делают ДНК-полимеразу Phusion U оптимальным ферментом для амплификации повреждённой ДНК, ДНК после бисульфитной конверсии, а также для постановки ПЦР со сниженным риском контаминации.

Наборы Phusion U Green Hot Start комплектуются 5-кратными буферами Phusion Green, содержащими утяжеляющий агент и два маркерных красителя. Это позволяет наносить продукты ПЦР на гель без добавления дополнительных реактивов для электрофореза. Утяжеляющий агент и маркерные красители инертны, не влияют на ПЦР и не мешают использованию ПЦР-продуктов в реакциях лигирования или рестрикции, а также при секвенировании.

ДНК-полимераза Phusion U Hot Start синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности наборов Phusion U Green Hot Start:

• высокая точность синтеза (в 25 раз выше по сравнению с Taq);
• способность встраивать в ДНК дУТФ и использовать урацил-содержащие последовательности ДНК в качестве матрицы;
• отсутствие неспецифического синтеза и деградации праймеров в процессе подготовки ПЦР;
• высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• возможность нанесения ПЦР-продуктов на гель непосредственно после амплификации без добавления реагентов для электрофореза.

Области применения:

• амплификация ДНК после бисульфитной конверсии;
• амплификация повреждённой или деградированной ДНК;
• ПЦР с минимальным риском контаминации посторонними ПЦР-продуктами;
• методы клонирования на основе вырезания урациловых остатков ( USER).

В состав набора входят:

ДНК-полимераза Phusion U Hot Start – новая термостабильная ДНК-полимераза, полученная генно-инженерным путём. Благодаря внесению модификации в дНТФ-связывающий карман полимеразы Phusion было снято ограничение, характерное для высокоточных полимераз – неспособность встраивать дезоксиурацилтрифосфат. Phusion U способна как встраивать урациловый остаток, так и считывать его в ДНК-матрице.

Помимо этого, Phusion U обладает всеми характеристиками ДНК-полимераз Phusion – точностью, скоростью, способностью синтезировать длинные последовательности (до 20 тыс. п.н.). Частота ошибок у полимеразы Phusion U в 25 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы. Встроенная функция горячего старта реализуется благодаря комбинации фермента со специфическим лигандом Affibody, ингибирующим полимеразную и 3’→5’ экзонуклеазную активности при комнатной температуре.

Эти особенности делают ДНК-полимеразу Phusion U оптимальным ферментом для амплификации повреждённой ДНК, ДНК после бисульфитной конверсии, а также для постановки ПЦР со сниженным риском контаминации.

ДНК-полимераза Phusion U Hot Start синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.

ДНК-полимераза Phusion U Hot Start также доступна в формате Green и в составе мастер-микса – готовой 2-кратной смеси для ПЦР.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности наборов Phusion U Hot Start:

• высокая точность синтеза (в 25 раз выше по сравнению с Taq);
• способность встраивать в ДНК дУТФ и использовать урацил-содержащие последовательности ДНК в качестве матрицы;
• отсутствие неспецифического синтеза и деградации праймеров в процессе подготовки ПЦР;
• высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд.

Области применения:

• амплификация ДНК после бисульфитной конверсии;
• амплификация повреждённой или деградированной ДНК;
• ПЦР с минимальным риском контаминации посторонними ПЦР-продуктами;
• методы клонирования на основе вырезания урациловых остатков ( USER).

В состав набора входят:

• ДНК-полимераза Phusion U Hot Start (2 Ед/мкл);
  
• 5Х буфер Phusion HF*;
• 5Х буфер Phusion GC*;
• ДМСО.

* в состав 5Х буферов Phusion уже входит 7,5 мМ MgCl₂.

ДНК-полимераза Phusion является золотым стандартом для высокопроизводительной ПЦР. Частота ошибок у этой полимеразы – более чем в 50 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы и в 6 раз ниже, чем у Pfu. ДНК-полимераза Phusion – наилучший выбор для клонирования и других экспериментов, требующих высокой точности при синтезе ДНК. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов.

ДНК-полимераза Phusion синтезирует фрагменты ДНК с тупыми концами.

Также возможна комплектация с буфером Green, содержащим утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР) и мастер-миксы с ДНК-полимеразой Phusion – готовые 2-кратные реакционные смеси для ПЦР.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности ДНК-полимеразы Phusion:

• высокая точность синтеза (в 52 раза выше по сравнению с Taq);
• более высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• универсальность – практически не требуется оптимизация условий ПЦР;
• больший выход ПЦР-продукта при минимальном количестве фермента.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• ПЦР длинных фрагментов (до 20 тыс. п.н.);
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• получение микрочипов.

В состав набора входят:

• ДНК-полимераза Phusion (2 Ед/мкл);
• 5Х буфер Phusion HF*;
• 5Х буфер Phusion GC*;
• ДМСО;
• 50 мМ MgCl_₂.

* в состав 5Х буферов Phusion уже входит 7,55 мМ MgCl_₂.

ДНК-полимераза Super Fusion – это высокоточная ДНК-полимераза c горячим стартом состоит из ДНК-связывающего домена Sso7d из Saccharolobus solfataricus слитого с Pfu ДНК-полимеразой Pyrococcus furiosus и благодаря этому амплифицирует ПЦР-продукты с очень высокой скоростью и точностью, в 15 раз точнее, чем Taq ДНК полимераза, обладает устойчивостью к ингибиторам и может быть использована для синтеза сложных, GC-богатых и длинных ампликонов длиной до 30 тыс. п.н.

Технологии горячего старта реализованного в полимеразе дает возможность постановки ПЦР-реакции при комнатной температуре и исключает деградацию праймеров и матрицы во время подготовки ПЦР, а также уменьшает вероятность образования неспецифических ПЦР-продуктов.

ДНК-полимераза Super Fusion незаменима для генно-инженерных приложений в которых последовательность ПЦР-продуктов должна полностью соответствовать матрице.

Особенности ДНК-полимеразы Super Fusion

• Высокая точность синтеза: в 15 раза выше по сравнению сTaq ДНК-полимеразой;
• амплифицикация фрагментов длиной до 30 тыс. п.н.;
• амплифицикация сложных и GC-богатых участков ДНК;
• возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре;
• повышенная специфичность синтеза, отсутствие деградации праймеров и матрицы в процессе подготовки ПЦР;
• высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• устойчивость к ингибиторам;
• обладает 5' → 3' полимеразной активностью;
• обладает 3' → 5' экзонуклеазной активностью;
• очищена от плазмидной и геномной ДНК E.coli и подходит для молекулярно-биологических работ с E.coli.

Области применения ДНК-полимераза Super Fusion

• Высокоточная ПЦР;
• амплификация длинных фрагментов ДНК: до 30 тыс. п.о.;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мультиплексная ПЦР;
• аналих на основе микрочипов.

Комплект поставки: ДНК-полимераза Super Fusion; 5х буфер для проведения реакции, содержащий 7,5 мМ MgSO₄.

Условия хранения: -20 °С.

Pfu-HP ДНК-полимераза высокоточная является улучшенным вариантом Pfu ДНК-полимеразы, обладает большей стабильностью к ингибирующим агентам, более высокой 5'-3' полимеразной активностью и 3'-5' экзонуклеазной корректирующей активностью, синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.

Особенности Pfu-HP ДНК-полимеразы

• Высокая 3'-5' экзонуклеазная активность;
• высокая 5'-3' полимеразной активность;
• высокая термостабильность;
• стабильность к ингибирующим агентам;
• синтез ПЦР-продуктов с тупыми концами.

Применение Pfu-HP ДНК-полимеразы

• Высокоточная ПЦР;
• получение ПЦР-продуктов для клонирования;
• ПЦР GC-богатых матриц;
• ПЦР длинных фрагментов;
• сайт-направленный мутагенез.

Комплект поставки: Pfu-HP ДНК-полимераза, 5х буфер для проведения реакции.

Условия хранения: -20 °С.

ДНК-полимераза с «горячим» стартом Phanta Max является высокоточной ДНК-полимеразой с частотой ошибок амплификации в 53 раза ниже, чем у Taq ДНК-полимеразы, и в 6 раз ниже, чем у Pfu ДНК-полимеразы, и со скоростью амплификации в 4-150 раз выше чем у классических ДНК-полимераз. Phanta Max способна амплифицировать длинные фрагменты, например такие как 40 kb ДНК фага лямбда, 40 kb плазмидной ДНК, 20 kb геномной ДНК и 10 kb кДНК, обладает хорошей устойчивостью к ингибиторам ПЦР и может использоваться для прямой ПЦР (без предварительного выделения ДНК) бактерий, грибков, тканей растений, тканей животных и даже образцов цельной крови. ДНК-полимераза Phanta Max инактивирована специфическими моноклональными антителами, ингибирующими активность фермента при комнатной температуре, что дает возможность проводить подготовку реакции амплификации при комнатной температуре и исключает образование неспецифических ПЦР-продуктов. При амплификации образуются продукты имеющие «тупые» концы.

Преимущества высокоточной ДНК-полимеразы с «горячим» стартом Phanta Max

• Точность амплификации в 52 раза выше, чем у Taq ДНК-полимеразы, и в 6 раз выше, чем у Pfu ДНК-полимеразы;
• скорость амплификации в 4-150 раз выше, чем у классической Taq ДНК-полимеразы;
• высокая устойчивость к ингибиторам;
• оптимизированная буферная система широко применима к образцам разного типа;
• может использоваться для прямой ПЦР (без предварительного выделения ДНК) бактерий, грибков, тканей растений, тканей животных, образцов цельной крови.

Условия хранения: -20 °С.

Мастер-микс Phusion Plus представляет собой готовую к использованию 2-кратную смесь, содержащую ДНК-полимеразу Phusion Plus, реакционный буфер, хлорид магния и dNTP. Формат мастер-микса упрощает постановку ПЦР, уменьшает количество шагов пипетирования и сохраняет все особенности индивидуального фермента.

ДНК-полимераза Phusion Plus представляет собой высокоточную ДНК-полимеразу, которая имеет очень низкую частоту ошибок, быструю скорость элонгации и высокую устойчивость к ингибиторам. Частота ошибок у Phusion Plus ДНК-полимеразы более чем в 100 раз ниже, чем у Taq ДНК-полимеразы. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов, например, таких как ксилан, гуминовая кислота, гемин.

Новый реакционный буфер Phusion Plus включает запатентованные добавки, которые стабилизируют дуплексы праймера/матрицы во время стадии отжига при 60 °C. Эта уникальная буферная композиция повышает специфичность ПЦР без необходимости оптимизации температуры отжига для каждой пары праймеров, помогая экономить время и избегать ошибок при выполнении ПЦР. Кроме того, при проведении ПЦР с помощью ДНК-полимеразы Phusion Plus есть возможность совместной амплификации фрагментов ДНК разной длины с использованием одного и того же протокола.

Мастер-микс Phusion Plus неактивен при комнатной температуре благодаря механизму горячего старта, опосредованному молекулами Affibody, что позволяет проводить подготовку реакционной смеси при комнатной температуре. Активность фермента полностью восстанавливается после начальной стадии денатурации.

Преимущества мастер-микса Phusion Plus:

• высокая точность — обеспечивает в 100 раз большую точность синтеза, чем Taq ДНК-полимераза;
• удобная постановка реакции — обеспечивает универсальную температуру отжига 60 °C при проведении ПЦР;
• повышенная специфичность — модификация с горячим стартом снижает неспецифическую амплификацию и деградацию праймеров;
• стабильность — автоматизация благодаря 24-часовой стабильности приготовленной реакционной смеси;
• высокая устойчивость к ингибиторам — работает с ДНК неоптимальной чистоты.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• синтез GC-богатых участков ДНК;
• амплификация длинных фрагментов (до 20 тыс. п.о.);
• сайт-специфическая ПЦР;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мультиплексная ПЦР.

Условия хранения — 20 °С.

Мастер-микс Phusion Plus Green представляет собой готовую к использованию 2-кратную смесь, содержащую ДНК-полимеразу Phusion Plus, реакционный буфер, хлорид магния и dNTP, дополнительно содержит реагент плотности и два трекинговых красителя для непосредственного нанесения продуктов ПЦР на гели.

ДНК-полимераза Phusion Plus представляет собой высокоточную ДНК-полимеразу, которая имеет очень низкую частоту ошибок, быструю скорость элонгации и высокую устойчивость к ингибиторам. Частота ошибок у Phusion Plus ДНК-полимеразы более чем в 100 раз ниже, чем у Taq ДНК-полимеразы. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов, например, таких как ксилан, гуминовая кислота, гемин.

Новый реакционный буфер Phusion Plus включает запатентованные добавки, которые стабилизируют дуплексы праймера/матрицы во время стадии отжига при 60 °C. Эта уникальная буферная композиция повышает специфичность ПЦР без необходимости оптимизации температуры отжига для каждой пары праймеров, помогая экономить время и избегать ошибок при выполнении ПЦР. Кроме того, при проведении ПЦР с помощью ДНК-полимеразы Phusion Plus есть возможность совместной амплификации фрагментов ДНК разной длины с использованием одного и того же протокола.

Мастер-микс Phusion Plus Green неактивен при комнатной температуре благодаря механизму горячего старта, опосредованному молекулами Affibody, что позволяет проводить подготовку реакционной смеси при комнатной температуре. Активность фермента полностью восстанавливается после начальной стадии денатурации.

Преимущества мастер-микса Phusion Plus Green:

• высокая точность — обеспечивает в 100 раз большую точность синтеза, чем Taq ДНК-полимераза;
• удобная постановка реакции — обеспечивает универсальную температуру отжига 60 °C при проведении ПЦР;
• повышенная специфичность — модификация с горячим стартом снижает неспецифическую амплификацию и деградацию праймеров;
• стабильность — автоматизация благодаря 24-часовой стабильности приготовленной реакционной смеси;
• высокая устойчивость к ингибиторам — работает с ДНК неоптимальной чистоты.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• синтез GC-богатых участков ДНК;
• амплификация длинных фрагментов (до 20 тыс. п.о.);
• сайт-специфическая ПЦР;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мультиплексная ПЦР.

Условия хранения — 20 °С.