Содержание статьи:
О решениях ThermoFS
Решения ThermoFS для клеточной биологии представлены двумя брендами – это пластик Nunc и реактивы Gibco.
Для каждого этапа работы с клетками компания предлагает свою продукцию, позволяющую выполнить научные задачи на современном уровне.
Лабораторный пластик для работы с клетками
Любое великое дело можно испортить какой-нибудь мелочью, а значит, в сложных рабочих процессах, которые реализуются в клеточной биологии, важна каждая деталь.
И первой такой деталью является клеточный пластик – расходный материал, при выборе которого важен не только формат, в котором предстоит работать (с точки зрения объема), но и тип поверхности.
Так, в работе с клетками применяются специальные флаконы – например, такие, емкостью 160 мл со скошенным горлышком. Эти емкости снабжены специальным фильтром для аэрации клеточной суспензии.
Отметим, что компания предоставляет возможность пользователю бесплатно попробовать любой формат пластика в своей работе – например, несколько планшетов или дисков.
В зависимости от специфики клеток, с которыми работает исследователь, в частности, от степени прикрепления этих клеток, предпочтительными могут быть разные типы пластика.
Например, разработан пластик с покрытием, имитирующим белки внеклеточного матрикса. Далее у нас идет поверхность в шестилуночном формате, которая может заменять слои фидерных клеток при культивировании стволовых клеток, в этом случае пользователю не нужно делать какие-то дополнительные действия – все стандартизировано, от раза к разу он получает один и тот же планшет с одинаковым покрытием.
Для процессов, где нежелательно, чтобы клетки «садились», можно использовать поверхность «сфера», которая тоже представлена в разных форматах – в виде чашек и планшетов.
Интересен тип поверхности UpCell, который позволяет снимать клетки с пластика, не трипсинизируя их. Как правило, это нужно, чтобы снять монослой, либо чтобы сохранять различные поверхностные структуры, которые впоследствии могут понадобиться для анализа. Поверхность UpCell тоже бывает в разных форматах: в виде планшета и дисков, на которых непосредственно можно выращивать клетки.
Снять клетки с поверхности UpCell без трипсинизации возможно за счет изменения свойств поверхности при изменении температурного режима. Пока клетки находятся в инкубаторе при 37 градусах, они находятся в прикрепленном состоянии. Если вынести их из инкубатора, то температура окружающей среды изменяется, и при комнатной температуре клетки открепляются от поверхности, так как изменились ее свойства. Таким образом, играя с температурой, можно изменять свойства поверхности.
Холодильник не потребуется
ThermoFS предлагает также широкий спектр реактивов для клеточной биологии, стабильных при комнатной температуре.
Это портфолио называется BenchStable и позволяет пользователю длительно сохранять реактивы, поскольку все они поставляются в светозащитной таре, так что кроме стабильности при комнатной температуре им обеспечена и защита от воздействия света.
В этом портфолио есть привычные исследователям культуральные среды в стандартном формате MEM, DMEM, RPMI, применяемые в зависимости от типа клеток, с которыми проводится работа.
Кроме того, рекомендуется добавка GlutaMAX как источник глютамина. При добавлении чистого глютамина в клеточную суспензию будут выделяться ионы аммония, что при длительном культивировании токсично воздействует на клетки. Добавка GlutaMAX лишена этого свойства.
Стабильный при комнатной температуре аналог трипсина – рекомбинантный TrypLE – не разрушается с течением времени: фермент не «съедает» сам себя
Большие запасы таких реактивов удобнее хранить, не увеличивая мощность используемого холодильного оборудования.
Максимальный комфорт для клеток
Тем, кто работает с сыворотками, наверняка знаком формат сывороток от ThermoFS под названием One Shot. Его удобство состоит в дозировке, позволяющей использовать сразу весь объем. Обычно сыворотка поставляется в больших флаконах, что вынуждает пользователя аликвотировать ее во флаконы по 50 мл и замораживать, используя по мере необходимости: несколько раз размораживать и замораживать весь объем нельзя. ThermoFS перешел на выпуск сыворотки сразу во флаконах по 50 мл, что позволяет экономить время и расходные материалы.
Следует отметить, что в последнее время наблюдается дефицит сыворотки по всему миру, что вызвало повышение цен на нее. Поэтому для работы с клетками предлагаются альтернативные варианты – бессывороточные среды и различные заменители сывороток. В клеточной терапии наш выбор – бессывороточные среды либо заменители, которые не содержат компонентов животного происхождения. Следует отметить две новинки среди такой продукции.
Среда SteamScale PSC позволяет культивировать стволовые клетки вместо прикрепленного вида в суспензии. Таким образом, можно наращивать обороты и доходить до миллионов клеток гораздо быстрее, чем при использовании стандартного протокола.
Еще один интересный продукт, используемый при исследованиях в клеточной терапии – Gibco Human Plasma-like Medium (HPLM). Это специальная среда, имитирующая состав плазмы.
Очень часто, когда клетки выращивают в стандартных RPMI-1640, концентрация реактивов в такой среде максимальная, чтобы «закормить» клетки и они лучше росли. Но такие условия не являются физиологическими. По 29 основным компонентам ThermoFS снизил содержание до физиологических уровней. Кроме того, было добавлено более 30 дополнительных компонентов, которые сделали среду наиболее приближенной к условиям исходного материала.
Все реактивы, которые мы рекомендуем использовать для клеточной терапии –фосфатно-солевой буфер, среды, ферменты – поставляются с маркировкой CTS – (Cell Therapy Systems) на емкостях. Для производства компания рекомендует использовать именно эти реактивы, потому что они производятся по международным стандартам и имеют все необходимые сертификаты (какие именно – уточняется для каждого реактива отдельно).
Если своих ресурсов недостает…
ThermoFS предлагает антитела, реагенты, флюорофоры под различные нужды клеточных биологов, а также оборудование, которому посвящен отдельный материал.
А в этой публикации стоит отметить еще один – более легкий – способ получить клеточную линию или культуру стволовых клеток, генно-инженерную конструкцию, внести модификации в эти клетки.
Все эти исследования можно заказать в разделе «Услуги на заказ» ThermoFS. У компании есть несколько научно-исследовательских лабораторий по всему миру, которые реализуют такие задачи. Таким образом, лаборатория-заказчик получает доступ к технологиям и оборудованию, которого у нее нет, и вряд ли появится в обозримом будущем, а кроме того – доступ к техническим знаниям, навыку персонала, особенно если лаборатория только делает первые шаги в какой либо области и со сложной задачей рискует не справиться. Тогда «услуги на заказ» ощутимо ускоряют процесс научных разработок. Компания синтезирует гены, короткие фрагменты или достаточно длинные, можно заказать получение плазмид или конструирование вектора на заказ, синтез пептидов на заказ, в том числе сложных, с различными модификациями. ThermoFS занимается производством антител на заказ, оказывает услуги по клеточному инжинирингу и клеточной биологии: получение и ведение клеточных линий, их генная модификация различными методами, получение индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, их репрограммирование и последующая характеристика. Цены на услуги не стандартизованы – проект рассчитывается индивидуально в зависимости от требований и изменяется в диапазоне от 100 до десятков тысяч долларов.
О конференции вы можете прочитать здесь
